最早出現的是1964年開發的基於細胞的培養測定法
。目前，國內外應用比較廣泛的是高效液相色譜法(HPLC)
、高效液相質譜聯用法(LC- MS/MS) 和免疫分析法
。
色譜法已廣泛應用於全血5-FU血藥濃度的測定
。雖然HPLC法準確性高
、靈敏度高
、精密度好
，但樣品處理複雜
，回收率低
，檢測時間長
，給大量樣本快速檢測帶來一定困難
。
高效液相質譜聯用法選用質譜檢測器
，可利用任一質荷比或多個質荷比的離子信號進行物質的濃度檢測
，具有血量少
，樣品處理過程簡單
，節省溶劑用量及檢測時間短等優點
。同時
，高效液相和質譜聯用後
，分辨性能高
，靈敏度高
，分析速度快
，是一種高特異性的檢測方法
。但存在儀器價格昂貴
，操作人員專業技術要求高
，不易普及等缺點
。
化學發光免疫分析法具有靈敏度高
、寬的線性動力學範圍
、光信號持續時間長
、分析方法簡便快速結果穩定
、誤差小
、安全性好及使用期長
、樣本需求量少
、樣本預處理簡單和適用於全自動分析儀等優點
，與其他方法比較優勢
，更好的促進 5-FU 血藥濃度監測在臨床中的開展
。